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Jun 24, 2023Jun 24, 2023

Parasites & Vectors Band 16, Artikelnummer: 260 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Fasziolose (Fasciola hepatica) und Paramphistomose (Calicophoron daubneyi) sind zwei wichtige Infektionen bei Nutztieren. Calicophoron daubneyi ist die vorherrschende Paramphistomidae-Art in Europa und ihre Prävalenz hat in den letzten 10–15 Jahren zugenommen. In Italien gibt es Hinweise darauf, dass die Prävalenz von F. hepatica bei Wiederkäuern im südlichen Teil niedrig ist, in derselben Gegend wurde jedoch kürzlich über eine hohe Prävalenz von C. daubneyi berichtet. Angesichts der Bedeutung zuverlässiger Instrumente für die Diagnose von Leber- und Pansenegeln bei Wiederkäuern bewertete diese Studie die diagnostische Leistung der Techniken Mini-FLOTAC (MF), Flukefinder® (FF) und Sedimentation (SED) zum Nachweis und zur Quantifizierung von F. hepatica und C . daubneyi-Eier unter Verwendung von dotierten und natürlich infizierten Kotproben von Rindern.

Kurz gesagt, negative Kotproben von Rindern wurden künstlich entweder mit F. hepatica- oder C. daubneyi-Eiern versetzt, um unterschiedliche Eizahlwerte zu erreichen: 10, 50 und 100 Eier pro Gramm (EPG) Kot. Darüber hinaus wurden zehn natürlich infizierte Rinderbetriebe aus Süditalien mit entweder F. hepatica und/oder C. daubneyi ausgewählt. Für jeden Betrieb wurden die Proben einzeln nur mit der MF-Technik und als Pools mit der MF-, FF- und SED-Technik analysiert. Die Bayes'sche latente Klassenanalyse (LCA) wurde verwendet, um die Sensitivität und Genauigkeit der vorhergesagten Infektionsintensität sowie der Infektionsrate in den natürlich infizierten Betrieben abzuschätzen.

Das Ergebnis dieser Studie zeigte, dass die höchste Anzahl an gewonnenen Eiern (F. hepatica und C. daubneyi) mit MF erhalten wurde, gefolgt von FF und SED in infizierten Proben mit 50 und 100 EPG und bei niedrigeren Infektionswerten von 10 EPG FF lieferte die besten Ergebnisse. Darüber hinaus wurde die Sensitivität für alle in die Studie einbezogenen Techniken auf > 90 % bei Infektionsniveaus > 20 EPG sowohl für F. hepatica- als auch für C. daubneyi-Eier geschätzt. Allerdings war MF die genaueste der drei untersuchten Techniken zur Schätzung der Intensität einer Zufallsinfektion. Dennoch können alle drei Techniken potenziell die Infektionsrate auf Betriebsebene genau abschätzen.

Um die FEC von Fluke-Eiern zu verbessern, sind Optimierung und Standardisierung der Techniken erforderlich.

Unter den parasitären Helminthen, die Süßwasserschnecken (z. B. Galba truncatula) übertragen können, sind Fasciola hepatica (Leberegel) und Calicophoron daubneyi (Pansenegel) in Ländern mit gemäßigtem Klima weit verbreitet. Fasziolose ist vor allem in Westeuropa weit verbreitet [1,2,3,4] und führt zu Produktionsverlusten mit erheblichen Kosten von > 3 Milliarden US-Dollar pro Jahr für die weltweite Viehzucht [5].

Paramphistomose gilt in Europa als eine neu auftretende parasitäre Erkrankung von Wiederkäuern [6]. In den letzten 20 Jahren haben Inzidenz und Prävalenz in Europa deutlich zugenommen, und in verschiedenen Ländern wurden zahlreiche Ausbrüche klinischer Manifestationen gemeldet, die hauptsächlich durch C. daubneyi, die in Europa vorherrschende Paramphistomidae-Art, verursacht wurden [7,8,9,10,11]. ]. Klinische Paramphistomose wird meist durch eine große Belastung mit juvenilen Egeln im Dünndarm des infizierten Wirts verursacht, da adulte Parasiten, die sich im Allgemeinen im Pansen und Retikulum befinden, recht gut vertragen werden [12].

In Italien scheint die Prävalenz von F. hepatica bei Wiederkäuern gering zu sein (0,7–6,0 % bei Schafen und 0,9–7,8 % bei Rindern); Allerdings wurde kürzlich über eine hohe Prävalenz von C. daubneyi (4,5–51,1 % bei Schafen und 9,6–60,9 % bei Rindern) im gleichen Gebiet berichtet [13,14,15].

Die Diagnose ist sehr wichtig für die Durchführung der effektivsten Programme zur Fasziolose- und Paramphistomose-Kontrolle [16].

Die Ergebnisse einer Umfrage von Hoyle et al. [17] zeigten Verwirrung unter Schaf- und/oder Rinderhaltern hinsichtlich der Diagnose und Bekämpfung von Egeln und unterstrichen die Notwendigkeit, Ratschläge zu bewährten Verfahren zu geben. Die Diagnose und Überwachung von Fasziolose und Paramphistomose bei Wiederkäuern ist eine Herausforderung. Normalerweise stammen Informationen über das Vorhandensein von Leberegeln in einem Betrieb aus Lebervernichtungsberichten [18], die auf Sichtkontrollen in Schlachthöfen basieren. Diese Verfahren sind jedoch unterschiedlich und möglicherweise fehlerhaft, da sie nicht standardisiert sind [19]. Es gibt mehrere Tests für die Ante-Mortem-Diagnose von Saugwürmern, aber keiner kann als ausreichend empfindlich und spezifisch für den Einsatz vor Ort angesehen werden [20] wie der „Pen-Side-Test“. Auf Koproantigenen basierende Techniken sind vielversprechende Werkzeuge in der Zufallsdiagnose; Sie zeigten eine 100-prozentige Sensitivität beim Nachweis experimenteller Fasziolose bei Schafen und lieferten Informationen über die Korrelation zwischen der Belastung durch Zufallsgeneratoren und den Koproantigenmengen [21]. ELISA-basierte Techniken können jedoch nicht direkt im landwirtschaftlichen Betrieb eingesetzt werden und wurden nicht umfassend unter Feldbedingungen validiert, um die bei experimentellen Infektionen erzielte Empfindlichkeit zu bestätigen [22].

Die Zählung von Fluke-Kot-Eiern (flukeFECs) ist stattdessen einfach und schnell [19] und kann auch direkt auf dem Bauernhof durchgeführt werden, da weder spezielle Probenahmetechniken noch hochentwickelte Laborausrüstung erforderlich sind. FlukeFECs werden routinemäßig in der veterinärmedizinischen Parasitendiagnose mit einer Spezifität von fast 100 % eingesetzt, obwohl sie nur offene Infektionen erkennen können [20]. Es gibt kein Goldstandard-Diagnosetool für eine Zufallsinfektion, daher wird zur Bestätigung einer Zufallsinfektion häufig eine Kombination aus klinischen Symptomen, Weideverlauf, serologischen, Koproantigen- und Zufalls-FECs und/oder Schlachthofberichten herangezogen. Es wurden mehrere Variationen von flukeFECs entwickelt, die einfache Sedimentation (SED) [23], Sedimentation kombiniert mit Flotation [23], Sedimentation mit Feinfiltration [24], Flukefinder®-Technik (FF) [25] oder Flotation mit (Mini-) FLOTAC-Techniken [1, 26]. Angesichts der Bedeutung zuverlässiger Instrumente für die Diagnose von Leber- und Pansenegeln bei Wiederkäuern zielte diese Studie darauf ab, die diagnostische Leistung der MF-, FF- und SED-Techniken zum Nachweis und zur Quantifizierung von F. hepatica- und C. daubneyi-Eiern mithilfe von dotierten und natürlich infizierten Rinderfäkalien zu bewerten Proben.

Negative Kotproben von Rindern wurden künstlich entweder mit F. hepatica- oder C. daubneyi-Eiern versetzt, um unterschiedliche Eizahlwerte von 10, 50 oder 100 Eiern pro Gramm (EPG) Kot zu erreichen. Die F. hepatica- und C. daubneyi-positiven und -negativen Kotproben wurden von erwachsenen Rindern (> 24 Monate alt) in drei Betrieben in der Region Kampanien (Süditalien) gesammelt. Natürlich infizierte positive Proben von einem der beiden Saugwürmer wurden von Weidevieh gesammelt, während negative Proben von Milchkühen in Stallhaltung ohne Weidezugang gesammelt wurden.

Um die positiven Proben für eine mögliche Eizellentnahme sowie die negativen Proben, die experimentell infiziert werden sollten, zu identifizieren, wurde jede Probe in fünf Wiederholungen mit der FLOTAC-Basistechnik (Sensitivität = 94 % und Spezifität = 98 %) mit einer Nachweisgrenze von 1 analysiert EPG von Fäkalien mittels Zinksulfat-Flotationslösung (spezifisches Gewicht = 1,35) [14, 27]. Die positiven Rinder wurden als Spender für die Extraktion von F. hepatica- und C. daubneyi-Eiern aus dem Kot verwendet, wobei die von Bosco et al. beschriebene Technik zur Eigewinnung eingesetzt wurde. [28] mit einigen Modifikationen. Kurz gesagt, vier Siebe unterschiedlicher Maschenweite (1 mm, 250 μm, 212 μm und 63 μm) wurden verwendet, um die Fluke-Eier vom Kot zu trennen. Das 63-μm-Sieb wurde mit Leitungswasser gewaschen, um Eier zu gewinnen, und in einem konischen Becherglas 4 Minuten lang sedimentiert. Der Überstand wurde entfernt und das erhaltene Sediment war eine gereinigte Eiersuspension. Die Extraktionsmethode wurde für die beiden Egel separat angewendet, um monoinfizierte Proben zu erhalten. Die für jeden Egel erhaltenen gereinigten Eier wurden in destilliertem Wasser suspendiert, um ihre Konzentration durch Berechnung des arithmetischen Mittels der Eizahlen in zehn Aliquots zu je 10 μl zu bestimmen. Es wurden drei Konzentrationen von 10, 50 und 100 EPG hergestellt, indem drei negative Stuhlproben (helminthenfrei) mit geeigneten Eisuspensionen versetzt und homogenisiert wurden. Sechs Replikate jeder Probe wurden mit den drei Methoden (MF, FF und SED) analysiert (Abb. 1).

Anzahl der mit Eiern versetzten und natürlich infizierten (einzeln oder gepoolten) Stuhlproben, die mit den Techniken Mini-FLOTAC (MF), Flukefinder® (FF) und Sedimentation (SED) zum Nachweis und zur Quantifizierung von Fasciola hepatica- und Calicophoron daubneyi-Eiern analysiert wurden

Es wurden zehn Betriebe mit Egel-positiven Rindern (Infektionen mit C. daubneyi und/oder F. hepatica) in Süditalien ausgewählt. Diese Betriebe wurden anhand der diagnostischen Aktivitäten des Regionalzentrums zur Überwachung parasitärer Infektionen (CREMOPAR, Region Kampanien, Süditalien) identifiziert.

In jedem Betrieb wurden individuelle Kotproben direkt aus dem Rektum von 20 erwachsenen Rindern (> 12 Monate) entnommen. Für jeden Betrieb wurden die Proben einzeln nur mit der MF-Technik und als Pools auch mit der FF- und SED-Technik analysiert. Die vier Kotpools (jeweils bestehend aus 5 Proben) wurden unter Verwendung des von Rinaldi et al. beschriebenen Protokolls durchgeführt. [29] (Abb. 1).

Die drei kopromikroskopischen Methoden wurden sowohl für die versetzten als auch für die natürlich infizierten Proben gemäß den Anweisungen des Herstellers durchgeführt. Die Eizahlen im Stuhl (FECs; ausgedrückt in EPG) wurden unter Verwendung eines Multiplikationsfaktors von 5 für MF (0,2 g untersuchter Stuhl = 2 ml Stuhlsuspension, die 5 g in einem Gesamtvolumen von 50 ml enthält) und 0,5 für FF (2) ermittelt g untersuchter Kot) und 0,1 für SED (10 g untersuchter Kot) (Tabelle 1).

Die Empfindlichkeit der drei Techniken sowie die Genauigkeit bei der Vorhersage der Infektionsintensität wurden anhand der mit Eiern versetzten Stuhlproben abgeschätzt. Zunächst wurde die prozentuale Wiederfindung von Fluke-Eiern berechnet, um die Genauigkeit der FEC für jede Technik auf jeder Ebene der Eizählung zu beurteilen. Dabei wurde die folgende Formel verwendet: % Ei-Rückgewinnung = 100 – (wahre FEC – beobachtete FEC)/echte FEC × 100 [ 28]. Darüber hinaus wurde ein einfaches Modell entwickelt, um die Überstreuung der mit den verschiedenen Techniken gezählten Eier abzuschätzen, wobei davon ausgegangen wird, dass der Messfehler gemäß einem negativen Binomial verteilt wird (wie bei Prada et al. [30]), was eine flexiblere Annahme ist als unter Verwendung eines Poisson, wie in Atljia et al. [31]. Da die Größe der untersuchten Stuhlprobe (in Gramm) bei den drei Techniken unterschiedlich ist, muss die Dosierung in EPG auf die Anzahl der in der Stuhlprobe erwarteten Eier umgerechnet werden (Tabelle 1). Das Modell wird in einem Bayes'schen Framework unter Verwendung eines Gibbs-Sampling-Pakets in R [32], „jags“ [33] und „runjags“ [34] ausgeführt, mit einem Burn-in von 1000 (verworfene Läufe), wodurch insgesamt 10.000 Samples gezogen werden mit einer Verdünnung von 10.

Vorläufige Simulationen (nicht gezeigt) legten nahe, dass die Überdispersion bei den beiden untersuchten Parasitenarten gleich war; Daher wurde für jede Diagnosetechnik ein einziger Parameter verwendet. Unter Verwendung der Posteriorverteilungen der Überdispersion, die wir aus dem obigen Modell erhalten haben, haben wir 1.000 wiederholte Messungen über einen Bereich der tatsächlichen Infektionsintensität, gemessen in EPG, von 1 bis 100 (bei 0,5 EPG-Schritten, 199.000 Gesamtproben) für die drei Diagnosen simuliert. Anschließend berechneten wir die Sensitivität (Anteil der Proben, die korrekt als positiv identifiziert wurden) und die Genauigkeit bei der Schätzung der Infektionsintensität, indem wir die tatsächliche Infektionsintensität mit den durch die verschiedenen Diagnosen geschätzten Werten verglichen.

Um die Infektionsrate in den natürlich infizierten Betrieben abzuschätzen, haben wir nach jüngsten Arbeiten an anderen Parasiten ein Bayesianisches Modell zur latenten Klassenanalyse (LCA) entwickelt [30]. Der Infektionsstatus jedes einzelnen Tieres wird anhand der verschiedenen Diagnosen (sowohl MF auf individueller Ebene als auch deren Beitrag zu den gepoolten Proben) geschätzt. Bei jedem infizierten Individuum wird die Infektionsintensität (echte Eizahl) aus einer Gammaverteilung ermittelt. Die Parameter für die Gammaverteilung für C. daubneyi werden vom Modell geschätzt; Für F. hepatica konnte dieser jedoch aufgrund der geringen Anzahl positiver Proben nicht anhand dieser Daten abgeschätzt werden, weshalb er anhand der von Rinaldi et al. berichteten Daten berechnet wurde. [1]. Es wird davon ausgegangen, dass die Anzahl der Eier in jedem Pool der Durchschnitt der tatsächlichen Anzahl von Eiern der fünf zu diesem Pool beitragenden Individuen ist. Es wird davon ausgegangen, dass die Daten aus den verschiedenen Diagnosen aus einer negativen Binomialzahl der tatsächlichen Anzahl von Eiern (im Individuum oder im Pool) generiert werden. Der benötigte Überdispersionswert wurde aus den Posteriorverteilungen ermittelt, die aus dem obigen Modell für die mit Eiern versetzten Stuhlproben generiert wurden. Anschließend kann die Infektionsrate auf Betriebsebene geschätzt und die erwartete Infektionsrate auf Betriebsebene mit FF und SED, die nicht auf individueller Ebene erfasst wurden, simuliert werden. Wie zuvor haben wir die Pakete „jags“ [33] und „runjags“ [34] verwendet, um das Modell auszuführen; Wir haben erneut 1000 Läufe verworfen (Einbrennen) und insgesamt 10.000 Proben ohne Verdünnung gezogen. Der gesamte Code ist verfügbar unter: https://github.com/joaquinprada/Fluke-MF-FF-SED-Comparison.

In Tabelle 2 sind die Ergebnisse der EPG-Werte von F. hepatica und C. daubneyi unter Verwendung von mit Eiern versetzten Kotproben von Rindern bei verschiedenen bekannten EPG-Konzentrationen aufgeführt (10, 50, 100). Die Ergebnisse wurden als mittlerer EPG der sechs Wiederholungen ausgedrückt, wobei die Leistungen von drei verschiedenen in die Studie einbezogenen Techniken (MF, FF und SED) verglichen wurden. Der Ei-Dotierungstest ergab, dass mit allen Methoden Eier von F. hepatica und C. daubneyi aus Rinderkot gewonnen werden konnten, wobei MF die niedrigste Empfindlichkeit unter 15 EPG und SED die niedrigste über 15 EPG aufwies (Abb. 2). . Dennoch hatten alle drei Techniken eine Sensitivität von > 90 % bei Infektionsraten über 20 EPG. Darüber hinaus war MF beim Vergleich der tatsächlichen und geschätzten Infektionsintensität (in EPG) mit den verschiedenen Diagnoseverfahren die Technik, die die bessere Schätzung lieferte, sowohl hinsichtlich der Genauigkeit (mittlerer geschätzter EPG) als auch der Präzision (Größe des 95 %-Glaubwürdigkeitsintervalls). (Abb. 3).

Geschätzte Empfindlichkeit der drei Diagnosetechniken Mini-FLOTAC (MF), Flukefinder® (FF) und Sedimentation (SED) über einen Bereich von Infektionsintensitäten, gemessen in Eiern pro Gramm (EPG) Kot

Vergleich zwischen echter und geschätzter Infektionsintensität in Eiern pro Gramm (EPG) Kot. Die gestrichelte diagonale schwarze Linie zeigt an, wo wahre und geschätzte EPGs gleich sind. Die mittlere geschätzte Infektionsintensität wird durch die durchgezogenen Linien dargestellt, während der schattierte Bereich das 95 %-glaubwürdige Intervall über die drei Diagnosetechniken Mini-FLOTAC (MF), Flukefinder® (FF) und Sedimentation (SED) zeigt.

Bei der Auswertung der natürlichen Infektion in zehn Betrieben in Süditalien scheinen alle Betriebe mit C. daubneyi mit hoher Infektionsrate infiziert zu sein, während vier Betriebe offenbar negativ für F. hepatica sind oder eine niedrige Infektionsrate aufweisen (Abb. 4). Insgesamt ist die mit der MF-Technik auf individueller Ebene geschätzte Infektionsrate der vom Modell geschätzten Infektionsrate sehr ähnlich, auch wenn die Infektionsrate möglicherweise unterschätzt wird, wenn die Infektion niedrig ist (Abb. 4 – linke Seite). Simulierte FF- und SED-Diagnoseergebnisse auf individueller Ebene liefern auch vergleichbare Infektionsratenwerte in allen Betrieben für beide Parasitenarten (Abb. 4 – dunkelrot und dunkelgrün). Die mittleren EPGs in den gepoolten Proben waren für MF und FF höher als für SED (Tabelle 3).

Infektionsrate von Fasciola hepatica (links) und Calicophoron daubneyi (rechts) in zehn Betrieben in Süditalien. Die Infektionsrate durch Mini-FLOTAC wurde aus den Proben auf Einzelebene (lila) berechnet, während die mittlere Infektionsrate durch Flukefinder® (dunkelrot) und Sedimentation (dunkelgrün) aus den simulierten Daten auf Einzelebene geschätzt wurde. Die Modellschätzung, die alle drei Diagnosetechniken sowie sowohl Einzelproben als auch gepoolte Stichproben berücksichtigt, ist schwarz dargestellt. Fehlerbalken zeigen das 95 %-Glaubwürdigkeitsintervall

In dieser Studie wurde MF nach unserem Kenntnisstand zum ersten Mal mit FF und SED zum Nachweis von Leber- und Pansenwürmern in dotierten und natürlich infizierten Kotproben von Rindern verglichen. Der MF wurde bereits von Malrait et al. erfolgreich eingesetzt. [26] zur Beurteilung des Vorliegens von Pansenegelinfektionen und der FEC von C. daubneyi-Eiern, was zeigte, dass es sich um eine zuverlässige Methode mit einer Sensitivität und Spezifität von 94 % bzw. 98 % handelte. In unserer Studie ermöglichte die MF-Technik die Gewinnung der höchsten Anzahl an Eiern, gefolgt von FF und SED für versetzte infizierte Proben mit 50 und 100 EPG, während ein niedrigerer Infektionsgrad von 10 EPG FF die besten Ergebnisse lieferte. Diese oben genannten Ergebnisse waren für beide Egel ähnlich. Insbesondere wurden die höchsten prozentualen Erholungsraten mit MF bei 100 EPG erzielt, aber die ermittelten Werte – 64,2 % für Leberegel und 70,8 % für Pansenegel – waren niedriger als die in früheren Studien für gastrointestinale Nematoden (GIN) bei Rindern berichteten ( 98,1 % von Amadesi et al. [35]; 70,9 % von Paras et al. [36]), Schafe (100 % von Bosco et al. [28] und Godber et al. [37]) und Pferde (74,2 % von Napravnikova et al. [38]), aber höher als bei Pferde-Strongyle-Eiern, die von Noel et al. berichtet wurden. [39] (42,6 %). Dieser Unterschied lässt sich dadurch erklären, dass Egeleier schwer sind, während GINs von Wiederkäuern und Pferden leichte Eier sind; Daher sind das Verhalten in Flotationslösungen und die Rückgewinnungsrate völlig unterschiedlich [27, 28, 35, 40]. Allerdings war die SED die am wenigsten effiziente Technik, da sie eine geringere Eizellenrate erzielte. Unsere Ergebnisse stimmen mit einer früheren Studie zum Vergleich zwischen FF- und SED-Techniken überein, die zeigt, dass FF bei der Gewinnung von F. hepatica-Eiern im Kot von Schafen und Rindern effizienter war als die einfache Becker-Sedimentation; Tatsächlich war es bereits bei niedrigen Infektionsraten in der Lage, 2 EPG mit einer höheren Empfindlichkeit (100 %) zu erkennen [19]. Obwohl die Sedimentationsmethoden (dh einfache Methoden mit Feinfiltration und anschließender Flotation) am häufigsten zur Erkennung von Zufallsinfektionen verwendet werden, ist ihre Empfindlichkeit gering [16, 19]. Die geschätzte Sensitivität für alle in die Studie einbezogenen Techniken betrug > 90 %, wenn die Infektionsintensität > 20 EPG betrug (Abb. 2). Bei sehr geringen Infektionsintensitäten sinkt jedoch schätzungsweise die Empfindlichkeit, insbesondere bei MF, dessen Nachweisgrenze bei 5 EPG liegt. Die mit MF gewonnenen Erkenntnisse stimmen mit Zarate-Rendon et al. überein. [41], was zeigt, dass MF und FF auch beim Menschen bessere Ergebnisse als Kato-Katz für FEC von F. hepatica lieferten, mit einer Sensitivität von 100 % bei 96 EPG-Level, aber die Sensitivität nahm bei MF um 40 % und bei 60 % ab für FF auf Stufe 14 EPG. In unseren früheren Studien, in denen MF und FLOTAC zum Nachweis von Egeleiern verglichen wurden, ergab das Ergebnis, dass FLOTAC bei niedrigen Infektionsraten eine höhere Empfindlichkeit aufwies als MF. Der Schritt der Zentrifugation in der FLOTAC-Technik, der in der MF-Methode fehlt, trug dazu bei, die Anzahl der erkannten Zufallseier zu erhöhen [40, 42].

Andererseits ist MF die genaueste der drei Techniken zur Schätzung der Infektionsintensität, was mit früheren Arbeiten zu GIN bei Wiederkäuern und Pferden übereinstimmt [28, 35, 43]. FF und SED können jedoch die Infektionsintensität stärker über- oder unterschätzen, wobei diese Ergebnisse über den gesamten ausgewerteten Infektionsintensitätsbereich (von 1 bis 100 EPG) konsistent sind. In anderen Studien [35, 44, 45] verbessert sich die Genauigkeit, wenn der EPG in der Stuhlprobe steigt. Es ist jedoch sehr wichtig, auch bei geringen Infektionsraten Diagnosewerkzeuge mit einer niedrigen Nachweisgrenze und hoher Genauigkeit zu verwenden, da auch nur wenige Egel vorhanden sind (insbesondere bei F. hepatica und Schafen, die sehr empfindlich auf diesen Parasiten reagieren). kann zu einer deutlich verringerten Produktivität führen [46, 47].

Die von MF an natürlich infizierten Rindern gewonnenen Erkenntnisse zeigten, dass einzelne und gepoolte Proben für alle zehn analysierten Betriebe keine statistisch unterschiedlichen Ergebnisse für beide Saugwürmer ergaben, wie zuvor auch für GINs bei Wiederkäuern gezeigt wurde [29, 42, 48, 49, 50]. Darüber hinaus stimmt die geschätzte Prävalenz mit dem Modell, das die Informationen über die drei Techniken umfasst, mit der mit MF gemessenen Infektionsrate und der anhand der simulierten FF- und SED-Techniken geschätzten Infektionsrate überein. Alle Betriebe zeigten das Vorkommen von C. daubneyi bei einer sehr hohen Infektionsrate, während die Infektionsrate von F. hepatica in den meisten Betrieben mäßiger war. In vier Betrieben wurden keine positiven Proben gefunden, was darauf hindeutet, dass keine Infektion vorliegt (oder die Infektionsrate relativ niedrig ist). Aufgrund der geringen Anzahl der nachgewiesenen F. hepatica-Eier sind weitere Studien erforderlich, da die Intensität der Infektion in der Region nicht beurteilt werden konnte.

Um die FEC von Fluke-Eiern zu verbessern, sind Optimierung und Standardisierung der Techniken erforderlich. Die Kombination empfindlicher, genauer, präziser und standardisierter FEC-Techniken mit einem zuverlässigen automatisierten System ermöglicht nicht nur eine effiziente Beobachtung, sondern dank der Verwendung einer Software für künstliche Intelligenz auch eine Quantifizierung parasitärer Elemente [51, 52]. MF ist eine genaue Technik zur Schätzung der Infektionsintensität bei mittlerem bis hohem Niveau und kann in Endemiegebieten empfohlen werden, beispielsweise zur Diagnose von C. daubneyi in Süditalien.

Schließlich könnten weitere Studien wichtig sein, um fundierte Behandlungsentscheidungen zu unterstützen sowie den Schwellenwert für „wirtschaftlich relevante“ Infektionsraten zu bestimmen und die diagnostische Leistung der verschiedenen Tests um diesen Schwellenwert herum zu bewerten.

Alle während dieser Studie generierten oder analysierten Daten sind in diesem veröffentlichten Artikel enthalten. Die während der vorliegenden Studie verwendeten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage beim entsprechenden Autor erhältlich.

Dieser Artikel wurde nach der Veröffentlichung aktualisiert, sodass jede Instanz von „Flukefinder®“ als eingetragene Marke gekennzeichnet ist.

Mini-FLOTAC

Flukefinder®

Sedimentation

Eier pro Gramm

Anzahl der Kot-Eier

Rinaldi L, Biggeri A, Musella V, De Waal T, Hertzberg H, Mavrot F, et al. Schafe und F. hepatica in Europa: das GLOWORM-Erlebnis. Geospat-Gesundheit. 2015;9:309–17.

Artikel PubMed Google Scholar

Mas-Coma S, Valero MA, Bargues MD. Faszioliasis. Adv Exp Med Biol. 2019;1154:71–103.

Artikel PubMed Google Scholar

Munita MP, Rea R, Martinez-Ibeas AM, Byrne N, McGrath G, Munita-Corbalan LE, et al. Leberegel bei irischen Schafen: Prävalenz und Zusammenhang mit Managementpraktiken und Koinfektion mit Pansenegel. Parasitenvektoren. 2019;12:525.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Mas-Coma S, Valero MA, Bargues MD. Faszioliasis bei Menschen und Tieren: Ursprünge und weltweites Entwicklungsszenario. Clin Microbiol Rev. 2022;35:e0008819.

Artikel PubMed Google Scholar

Beesley NJ, Caminade C, Charlier J, Flynn RJ, Hodgkinson JE, Martinez-Moreno A, et al. Fasziola und Fasziolose bei Wiederkäuern in Europa: Ermittlung des Forschungsbedarfs. Transbound Emerg Dis. 2018;65:199–216.

Artikel PubMed Google Scholar

Huson KM, Oliver NAM, Robinson MW. Paramphistomose bei Wiederkäuern: eine in Europa auftretende parasitäre Krankheit. Trends Parasitol. 2017;33:836–44.

Artikel PubMed Google Scholar

Cringoli G, Taddei R, Rinaldi L, Veneziano V, Musella V, Cascone C, et al. Einsatz von Fernerkundungs- und geografischen Informationssystemen zur Identifizierung von Umweltmerkmalen, die die Verbreitung von Paramphistomose bei Schafen aus dem süditalienischen Apennin beeinflussen. Tierarzt Parasitol. 2004;122:15–26.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Rinaldi L, Perugini AG, Capuano F, Fenizia D, Musella V, Veneziano V, et al. Charakterisierung des zweiten internen transkribierten Spacers ribosomaler DNA von Calicophoron daubneyi aus verschiedenen Wirten und Standorten in Süditalien. Tierarzt Parasitol. 2005;131:247–53.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Ploeger HW, Ankum L, Moll L, van Doorn DCK, Mitchell G, Skuce PJ, et al. Vorkommen und Artidentität von Pansenwürmern bei Rindern und Schafen in den Niederlanden. Tierarzt Parasitol. 2017;243:42–6.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Fenemore C, Floyd T, Mitchell S. Rumen Fluke in Großbritannien. J Comp Pathol. 2021;184:31–6.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Červená B, Anettová L, Nosková E, Pafčo B, Pšenková I, Javorská K, et al. Der Gewinner bekommt alles: Dominanz von Calicophoron daubneyi (Digenea: Paramphistomidae) unter den Egeln bei mitteleuropäischen Rindern. Parasitologie. 2022;1–10.

O'Shaughnessy J, Garcia-Campos A, McAloon CG, Fagan S, de Waal T, McElroy M, et al. Epidemiologische Untersuchung eines schweren Pansenegel-Ausbruchs auf einem irischen Milchviehbetrieb. Parasitologie. 2018;145:948–52.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Bosco A, Nocerino M, Santaniello M, Maurelli MP, Cringoli G, Rinaldi L. Kartierung der räumlichen Verteilung des Pansensaugers Calicophoron daubneyi in einem Mittelmeerraum. Krankheitserreger. 2021;10:1

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Maurizio A, Perrucci S, Tamponi C, Scala A, Cassini R, Rinaldi L, et al. Bekämpfung von Magen-Darm-Würmern bei kleinen Wiederkäuern zur Vorbeugung von Anthelminthika-Resistenzen: die italienische Erfahrung. Parasitologie. 2023; 1–14.

Sanna G, Varcasia A, Serra S, Salis F, Sanabria R, Pipia AP, et al. Calicophoron daubneyi bei Schafen und Rindern auf Sardinien, Italien. Helminthologie. 2016;53:87–93.

Artikel Google Scholar

Sabatini GA, de Almeida BF, Claerebout E, Gianechini LS, Höglund J, Kaplan RM, et al. Praktischer Leitfaden zur Diagnostik von gastrointestinalen Nematoden, Leberegeln und Lungenwurminfektionen bei Wiederkäuern: Interpretation und Verwendbarkeit der Ergebnisse. Parasitenvektoren. 2023;16:58.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Hoyle RC, Rose Vineer H, Duncan JS, Williams DJL, Hodgkinson JE. Eine Umfrage unter Schaf- und/oder Rinderhaltern im Vereinigten Königreich zeigt Verwirrung hinsichtlich der Diagnose und Bekämpfung von Pansen- und Leberegeln. Tierarzt Parasitol. 2022;312:109812.

Artikel PubMed Google Scholar

Hanley J, Garcia-Ara A, Wapenaar W. Meinungen von Rinder- und Schafzüchtern zur Bereitstellung und Verwendung von Schlachthof-Abweisungsdaten im Vereinigten Königreich. Tierarztempfehlung. 2020;186:217.

Artikel PubMed Google Scholar

Reigate C, Williams HW, Denwood MJ, Morphew RM, Thomas ER, Brophy PM. Evaluierung von zwei Protokollen zur fäkalen Eierzählung von F. hepatica bei Schafen und Rindern. Tierarzt Parasitol. 2021;294:109435.

Artikel PubMed Google Scholar

Mazeri S, Sargison N, Kelly RF, Bronsvoort BM, Handel I. Bewertung der Leistung von fünf diagnostischen Tests für eine F. hepatica-Infektion bei natürlich infizierten Rindern unter Verwendung eines Bayesian-No-Gold-Standard-Ansatzes. Plus eins. 2016;11:0161621.

Artikel Google Scholar

Brockwell YM, Spithill TW, Anderson GR, Grillo V, Sangster NC. Vergleichende Kinetik des serologischen und Koproantigen-ELISA und der Kot-Eierzahl bei experimentell mit Fasciola hepatica infizierten Rindern und nach Behandlung mit Triclabendazol. Tierarzt Parasitol. 2013;196:417–26.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Calvani NED, George SD, Windsor PA, Bush RD, Šlapeta J. Vergleich der Früherkennung von F. hepatica bei experimentell infizierten Merinoschafen durch Echtzeit-PCR, Coproantigen-ELISA und Sedimentation. Tierarzt Parasitol. 2018;251:85–9.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Becker AC, Kraemer A, Epe C, Strube C. Empfindlichkeit und Effizienz ausgewählter koproskopischer Methoden – Sedimentation, kombinierte Zinksulfat-Sedimentation-Flotation und McMaster-Methode. Parasitol Res. 2016;115:2581–7.

Artikel PubMed Google Scholar

Arifin MI, Höglund J, Novobilský A. Vergleich molekularer und konventioneller Methoden zur Diagnose einer Fasciola hepatica-Infektion vor Ort. Tierarzt Parasitol. 2016;232:8–11.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Dixon R, Wescott R. Eine schnelle und genaue Stuhluntersuchungstechnik zur Diagnose von F. hepatica. Präsentiert auf der Jahrestagung der American Association of Veterinary Parasitologists. 1987; 28.

Malrait K, Verschave S, Skuce P, Van Loo H, Vercruysse J, Charlier J. Neue Einblicke in die pathogene Bedeutung, Diagnose und Behandlung des Pansenegels (Calicophoron daubneyi) bei Rindern. Tierarzt Parasitol. 2015;207:134–9.

Artikel PubMed Google Scholar

Cringoli G, Rinaldi L, Maurelli MP, Utzinger J. FLOTAC: neue multivalente Techniken zur qualitativen und quantitativen kopromikroskopischen Diagnose von Parasiten bei Tieren und Menschen. Nat-Protokoll. 2010;5:503–15.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Bosco A, Maurelli MP, Ianniello D, Morgoglione ME, Amadesi A, Coles GC, et al. Die Gewinnung zugesetzter Nematodeneier aus Pferde- und Schafkot durch drei Methoden. BMC Vet Res. 2018;14:7.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Rinaldi L, Amadesi A, Dufourd E, Bosco A, Gadanho M, Lehebel A, et al. Schnelle Beurteilung der Anzahl fäkaler Eier und der Reduzierung der Anzahl fäkaler Eier durch Mischprobenentnahme bei Rindern. Parasitenvektoren. 2019;12:353.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Prada JM, Touloupou P, Adriko M, Tukahebwa EM, Lamberton PHL, Hollingsworth TD. Verständnis der Beziehung zwischen Ei- und Antigen-basierter Diagnostik der Schistosoma mansoni-Infektion vor und nach der Behandlung in Uganda. Parasitenvektoren. 2018;11:21.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Atlija M, Prada JM, Gutiérrez-Gil B, Rojo-Vázquez FA, Stear MJ, Arranz JJ, et al. Implementierung eines erweiterten ZINB-Modells zur Untersuchung geringer Mengen natürlicher gastrointestinaler Nematodeninfektionen bei erwachsenen Schafen. BMC Vet Res. 2016;12:97.

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

R Core Team 2021. R: Eine Sprache und Umgebung für statistische Berechnungen. R Foundation for Statistical Computing, Wien, Österreich. 2021. https://www.R-project.org/.

Plummer M. JAGS: ein Programm zur Analyse bayesianischer grafischer Modelle mithilfe von Gibbs-Stichproben. In: Proceedings of the 3rd International Workshop on Distributed Statistical Computing (DSC 2003), Wien, 20.–22. März 2003; 1–10.

Denwood MJ. Runjags: ein R-Paket, das Schnittstellendienstprogramme, Modellvorlagen, parallele Berechnungsmethoden und zusätzliche Distributionen für MCMC-Modelle in JAGS bereitstellt. J Stat Softw. 2016;71:1–25.

Artikel Google Scholar

Amadesi A, Bosco A, Rinaldi L, Cringoli G, Claerebout E, Maurelli MP. Mit Eiern versetzte gastrointestinale Nematoden-Kotproben von Rindern: hohe Wiederfindungsraten mit der Mini-FLOTAC-Technik. Parasitenvektoren. 2020;13:230.

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Paras KL, George MM, Vidyashankar AN, Kaplan RM. Vergleich der Methoden zur Zählung von Koteiern bei vier Nutztierarten. Tierarzt Parasitol. 2018;257:21–7.

Artikel PubMed Google Scholar

Godber OF, Phythian CJ, Bosco A, Ianniello D, Coles G, Rinaldi L, et al. Ein Vergleich der Techniken zur Zählung fäkaler Eier mit FECPAK und Mini-FLOTAC. Tierarzt Parasitol. 2015;207:342–5.

Artikel PubMed Google Scholar

Nápravníková J, Petrtýl M, Stupka R, Vadlejch J. Zuverlässigkeit von drei gängigen Techniken zur Zählung von Koteiern zur Erkennung von Strongylid- und Spulwurminfektionen bei Pferden. Tierarzt Parasitol. 2019;272:53–7.

Artikel PubMed Google Scholar

Noel ML, Scare JA, Bellaw JL, Nielsen MK. Genauigkeit und Präzision der Mini-FLOTAC- und McMaster-Techniken zur Bestimmung der Eierzahl von Pferde-Strongylen. J Equine Vet Sci. 2017;48:182–7.

Artikel Google Scholar

Cringoli G, Maurelli MP, Levecke B, Bosco A, Vercruysse J, Utzinger J, et al. Die Mini-FLOTAC-Technik zur Diagnose von Helminthen- und Protozoeninfektionen bei Menschen und Tieren. Nat-Protokoll. 2017;12:1723–32.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Zárate-Rendón DA, Vlaminck J, Levecke B, Briones-Montero A, Geldhof P. Vergleich von Kato-Katz Thick Smear, Mini-FLOTAC und Flukefinder® zur Erkennung und Quantifizierung von Fasciola hepatica-Eiern in künstlich versetztem menschlichem Stuhl. Bin J Trop Med Hyg. 2019;101:59–61.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Maurelli MP, Dourado Martins OM, Morgan ER, Charlier J, Cringoli G, Letra Mateus T, et al. Eine qualitative Marktanalyse für Mini-FLOTAC und Fill-FLOTAC zur Diagnose von Helmintheninfektionen bei Wiederkäuern. Front Vet Sci. 2020;7:580649.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Rinaldi L, Krücken J, Martinez-Valladares M, Pepe P, Maurelli MP, de Queiroz C, et al. Fortschritte in der Diagnose von Magen-Darm-Nematoden bei Nutz- und Haustieren. Adv Parasitol. 2022;118:85–176.

Artikel PubMed Google Scholar

Mes TH. Technische Variabilität und erforderliche Probengröße von Verfahren zur Isolierung von Helmintheneiern. Tierarzt Parasitol. 2003;115:311–20.

Artikel PubMed Google Scholar

Das G, Savas T, Kaufmanna F, Idris A, Abela H, Gaulya M. Präzision, Wiederholbarkeit und Repräsentativität der Kot-Eizahlen bei mit Heterakis gallinarum infizierten Hühnern. Tierarzt Parasitol. 2011;183:87–94.

Artikel PubMed Google Scholar

Mazeri S, Rydevik G, Handel I, de Bronsvoort CBM, Sargison N. Abschätzung der Auswirkungen einer Fasciola hepatica-Infektion auf die Zeit, die britische Rinder benötigen, um das Schlachtgewicht zu erreichen. Sci Rep. 2017;7:7319.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Sabatini GA, de Almeida BF, Claerebout E, Sicalo Gianechini L, Hoglund J, Kaplan RM, et al. Praktischer Leitfaden zur Diagnostik von gastrointestinalen Nematoden, Leberegeln und Lungenwurminfektionen bei Wiederkäuern: Interpretation und Verwendbarkeit der Ergebnisse. Parasitenvektoren. 2023;16:58.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Rinaldi L, Levecke B, Bosco A, Ianniello D, Pepe P, Charlier J, et al. Vergleich einzelner und gepoolter Kotproben von Schafen zur Beurteilung der Intensität einer gastrointestinalen Strongylideninfektion und der Wirksamkeit von Anthelminthika unter Verwendung von McMaster und Mini-FLOTAC. Tierarzt Parasitol. 2014;205:216–23.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Kenyon F, Rinaldi L, McBean D, Pepe P, Bosco A, Melville L, et al. Zusammenführung von Kotproben von Schafen zur Beurteilung der Wirksamkeit von Anthelminthika unter Verwendung von McMaster und Mini-FLOTAC bei gastrointestinalen Strongyliden- und Nematodirus-Infektionen. Tierarzt Parasitol. 2016;225:53–60.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

George MM, Paras KL, Howell SB, Kaplan RM. Verwendung zusammengesetzter Stuhlproben zum Nachweis der Anthelminthika-Resistenz bei gastrointestinalen Nematoden von Rindern. Tierarzt Parasitol. 2017;240:24–9.

Artikel PubMed Google Scholar

Alva A, Cangalaya C, Quiliano M, Krebs C, Gilman RH, Sheen P, et al. Mathematischer Algorithmus zur automatischen Erkennung von Darmparasiten. Plus eins. 2017;12:e0175646.

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Cringoli G, Amadesi A, Maurelli MP, Celano B, Piantadosi G, Bosco A, et al. Das Kubic FLOTAC-Mikroskop (KFM): ein neues kompaktes digitales Mikroskop für die Zählung von Helmintheneiern. Parasitologie. 2021;148:427–34.

Artikel CAS PubMed Google Scholar

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Dieser Artikel basiert auf der Arbeit des Projekts „A Cross-Disciplinary Alliance to Identify, PREdict and prePARE for Emerging Vector-Borne Diseases – PREPARE4VBD“.

Diese Forschung wurde im Rahmen des Forschungs- und Innovationsprogramms Horizon 2020 der Europäischen Union unter der Finanzhilfevereinbarung Nr. 101000365 konzipiert und finanziert.

Abteilung für Veterinärmedizin und Tierproduktion, Universität Neapel Federico II, Regionales Zentrum für die Überwachung parasitärer Infektionen (CREMOPAR), Neapel, Italien

Antonio Bosco, Lavinia Ciuca, Maria Paola Maurelli, Paola Vitiello, Giuseppe Cringoli und Laura Rinaldi

Fakultät für Veterinärmedizin, Fakultät für Gesundheits- und Medizinwissenschaften, Universität Surrey, Guilford, Großbritannien

Joaquin M. Prada

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LR und GC konzipierten, gestalteten und koordinierten die Studie. AB, LC, MPM und PV führten Probenahmen und Laboranalysen durch. JMP führte die Bayes'sche Datenanalyse durch. AB, LC, JMP und MPM haben das Manuskript verfasst. LR und GC haben das Manuskript überarbeitet. Alle Autoren haben das endgültige Manuskript gelesen und genehmigt.

Korrespondenz mit Maria Paola Maurelli.

Wir haben von den Besitzern der landwirtschaftlichen Betriebe eine mündliche Einverständniserklärung zur Entnahme von Kotproben von Tieren eingeholt.

Unzutreffend.

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden Interessen haben.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Bosco, A., Ciuca, L., Maurelli, MP et al. Vergleich von Mini-FLOTAC, Flukefinder® und Sedimentationstechniken zum Nachweis und zur Quantifizierung von Fasciola hepatica- und Calicophoron daubneyi-Eiern anhand von dotierten und natürlich infizierten Rinderkotproben. Parasites Vectors 16, 260 (2023). https://doi.org/10.1186/s13071-023-05890-2

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Eingegangen: 28. März 2023

Angenommen: 19. Juli 2023

Veröffentlicht: 02. August 2023

DOI: https://doi.org/10.1186/s13071-023-05890-2

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